pemeriksaan Haemoglobin metode sahli dan cyanmethemoglobin

PEMERIKSAAN HAEMOGLOBIN (Hb)

1. METODE : SAHLI

Prinsip        : Darah + HCL 0,1N menjadi asam hematin yang berwarna kecoklatan. Warna ini diencerkan dalam tabung berskala sampai warnanya sama dengan warna pembanding. Tinggi miniskus pada skala menunjukkan kadar Hb dalam satuan gr% (gr/dL).

ALAT DAN BAHAN

a.        Warna pembanding

b.       Pipet Hb 20 mm³

c.        Tabung Hb berskala

d.       Aspirator

e.       Batang pengaduk

f.         Pipet tetes

g.        Darah + anticoagulant

Prosedur   :

a.  Masukkan larutan HCL 0,1N kedalam tabung hemoglobin sampai tanda 2,0.

b. Kemudian homogenkan sampel (darah + antikoagulant) à dihisap dengan pipet hemoglobin sampai tanda 0,02 ml (20 mm³).

c.  Kemudian sampel dimasukkan kedalam tabung hemoglobin yang sudah berisi HCL 0,1N (bagian luar pipet harus bersih).

d. Tabung dihomogenkan perlahan

     tanpa ada buih.

e. Warna yang terbentuk disamakan dengan standart dengan menambahkan aquadest.

f.   Membaca miniskus dengan latar belakang cahaya yang terang.

2.METODE :CYANMETHEMOGLOBIN

Prinsip        : Ferri cyanida dalam larutan Drabkins mengubah besi hemoglobin dari bentuk ferro menjadi cyanmethemoglobin yang berwarna stabil. Intensitas warna diukur pada fotometer panjang gelombang 546 nm, maka Optikel Densete larutan seimbang dengan konsentrasi hemoglobin.

ALAT DAN BAHAN

a.        R / drabkins

b.       Pipet Hb 20 mm³ atau micropipet 20µ

c.        Tabung reaksi (13 x 100 mm)

d.       Photometer 4010

e.       Tissue

f.         Standard Hb

g.        Darah + anticoagulant

Prosedur   :

a.  Mengisi 3 buah tabung reaksi (Balnko , Standard , Test) dengan larutan Drabkins  5 ml.

b. Kemudian homenkan darah yang sudah diketahui kadarnya à pipet sampel sebanyak 20 mm³  dengan pipet Hb ( 20 µl ) dengan mikropipet masukkan pada tabung standard.

c.  homenkan darah yang belum diketahui kadarnya à pipet sampel sebanyak 20 mm³  dengan pipet Hb ( 20 µl ) dengan mikropipet masukkan pada tabung test.

d. Tabung dikocok sampai homogen tanpa menimbulkan buih à ditutup dengan parafilm / aluminium voll /  kertas wrab à inkubasi pada suhu kamar selama 10 menit

e. Hidupkan spektrofotometer, atur pada λ = 546 nm, program = absorbant

f.   Melakukan pembacaan pada spektrofotometer (photometer 4010).

·   Memindahkan Blanko pada kuvet à tekan zero → baca pada spektofotometer untuk menentukan titik 0 nya.

·   Membaca standart Hb yang sudah diketahui kadarnya.

·   Test dipindahkan pada kuvet à tekan result →  baca absorbant test pada spektrofotometer

Perhitungan

Kadar Hb = Abs Tes x kadar Hb standard           

                      Abs Std

    Nilai Normal :

·   Laki – laki           : 14 – 17 gr/dL

·   Perempuan       : 12 – 15 gr/dL

terimakasih atas waktunya untuk membaca blog kami.. tinggalkan komentar terbaik anda disini ya..